en
×

分享给微信好友或者朋友圈

使用微信“扫一扫”功能。
作者简介:

李文胜(1996-),硕士研究生,主要从事高山植物进化生物学研究,(E-mail)winsherli@163.com。

通讯作者:

孙文光,博士,主要从事植物细胞学、系统与进化植物学研究,(E-mail)sunwenguang@vip.163.com。

中图分类号:Q943;Q949

文献标识码:A

文章编号:1000-3142(2023)10-1828-10

DOI:10.11931/guihaia.gxzw202209032

参考文献
ADAMS RP, 1968. Chromosome numbers in Hypericum and related genera [J]. Brittonia, 20(2): 95-106.
参考文献
ALBERTO CM, SANSO AM, XIFREDA CC, 2003. Chromosomal studies in species of Salvia (Lamiaceae) from Argentina [J]. Bot J Linn Soc, 141(4): 483-490.
参考文献
ALTINORDU F, PERUZZI L, YU Y, et al. , 2016. A tool for the analysis of chromosomes: KaryoType [J]. Taxon, 65(3): 586-592.
参考文献
BENTHAM G, 1832. Labiatarum genera et species: or a description of the genera and species of plants of the order Labiatae, with their general history, characters, affinities, and geographical distribution [M]. Bavaria: Ridgway: 190-312.
参考文献
BHATTACHARYA S, 1978. Study of some Indian members of the genus Salvia with references to the cytological behaviour [J]. Cytologia, 43(2): 317-324.
参考文献
CHEN YP, ZHAO F, PENG H, et al. , 2018. Chromosome numbers of 24 taxa of Lamiaceae from Southwest China [J]. Caryologia, 71(4): 298-306.
参考文献
ENGLER A, PRANTL KAE, 1899. Die Natürlichen pflanzenfamilien nebst ihren gattungen und wichtigeren arten, insbesondere den nutzpflanzen, unter mitwirkung zahlreicher hervorragender fachgelehrten begründet [M]. Leipzig: W. Engelmann: 270-275.
参考文献
FUJITA Y, 1970. Evolution of chromosome numbers in the Labiaceae, especially its relation to the classification and phylogeny of the genus Salvia based on constituents of essential oils [J]. Acta Phytotax Geobot, 24(1): 113-121.
参考文献
GILL LS, 1970. Cytological observations on West-Himalayan Labiatae: Tribe Stachydeae [J]. Phyton Vicente Lopez, 27(2): 177-184.
参考文献
HAQUE MS, 1980. Karyotypes and chromosome morphology in the genus Salvia Linn [J]. Cytologia, 45(4): 627-640.
参考文献
HONG PP, YANG JY, CHEN HW, et al. , 2011. Optimization of chromosome sectioning and chromosome counting of Salvia splendens [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin, 31(10): 2124-2128. [洪培培, 杨建玉, 陈洪伟, 等, 2011. 一串红染色体制片技术优化与计数 [J]. 西北植物学报, 31(10): 2124-2128. ]
参考文献
HU GX, XIANG CLEI, LIU ED, et al. , 2016. Karyotypic study of eighteen taxa of Salvia Lamiaceae from China [J]. Caryologia, 69(1): 50-57.
参考文献
HU GX, TAKANO A, DREW BT, et al. , 2018. Phylogeny and staminal evolution of Salvia (Lamiaceae, Nepetoideae) in East Asia [J]. Ann Bot, 122(4): 649-668.
参考文献
HUANG YB, WEI YK, GE BJ, et al. , 2014. Pollination mechanisms of genus Salvia (Lamiaceae) in East Asia (China) [J]. Acta Ecol Sin, 34(9): 2282-2289. [黄艳波, 魏宇昆, 葛斌杰, 等, 2014. 鼠尾草属东亚分支的传粉模式 [J]. 生态学报, 34(9): 2282-2289. ]
参考文献
KAZUTAKA K, KAZUHARU M, KEI-ICHI K, et al. , 2002. MAFFT: a novel method for rapid multiple sequence alignment based on fast Fourier transform [J]. Nucl Acid Res, 30(14): 3059-3066.
参考文献
LEVAN A, FREDGA K, SANDBERG AA, 1964. Nomenclature for centromeric position on chromosomes [J]. Hereditas, 52(2): 201-220.
参考文献
LI BY, 1987. On the boundaries of the Hengduan Mountains [J]. J Mt Res, 5(2): 74-82. [李炳元, 1987. 横断山脉范围探讨 [J]. 山地研究, 5(2): 74-82. ]
参考文献
LI HW, HEDGE IC, 1994. Flora of China: Vol. 17 [M]. Beijing & St. Louis: Science Press & Missouri Botanical Garden Press: 195-222.
参考文献
LI MX, CHEN RY, 1985. A suggestion on the standardization of karyotype analysis in plants [J]. Wuhan Bot Res, 3(4): 297-302. [李懋学, 陈瑞阳, 1985. 关于植物核型分析的标准化问题 [J]. 武汉植物学研究, 3(4): 297-302. ]
参考文献
MASOUD S, ALIJANPOO B, KHAYYAMI M, 2010. Contribution to cytology of genus Salvia L. (Lamiaceae) in Iran [J]. Caryologia, 63(4): 405-410.
参考文献
NGUYEN LT, SCHMIDT HA, VON HA, et al. , 2015. IQ-TREE: a fast and effective stochastic algorithm for estimating maximum-likelihood phylogenies [J]. Mol Biol Evol, 32(1): 268-274.
参考文献
NIE ZL, SUN H, GU ZJ, 2004. A survey of chromosome numbers from angiosperms of the Hengduan Mountains, S·W·China [J]. Acta Bot Yunnan, 26(1): 35-57. [聂泽龙, 孙航, 顾志建, 2004. 横断山区被子植物染色体研究概况 [J]. 云南植物研究, 26(1): 35-57. ]
参考文献
ÖZDEMI· RC, ŞENEL G, 1999. The morphological, anatomical and karyological properties of Salvia sclarea L. [J]. Turk J Bot, 23(1): 7-18.
参考文献
PASZKO B, 2006. A critical review and a new proposal of karyotype asymmetry indices [J]. Plant Syst Evol, 258(1-2): 39-48.
参考文献
PERUZZI L, EROGLU H, 2013. Karyotype asymmetry: again, how to measure and what to measure? [J]. Comp Cytogenet, 7(1): 1-9.
参考文献
PERUZZI L, ALTNORDU F, 2014. A proposal for a multivariate quantitative approach to infer karyological relationships among taxa [J]. Comp Cytogenet, 8(4): 337-349.
参考文献
QINGHAI-TIBET PCSET, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES, 1993. Vascular plants of Hengduan Mountains Area (Vol. 2) [M]. Beijing: Science Press: 1694-1706. [中国科学院青藏高原综合科学考察队, 1993. 横断山区维管植物(下册) [M]. 北京: 科学出版社: 1694-1706. ]
参考文献
RANJBAR M, PAKATCHI A, BABATAHERI Z, 2015. Chromosome number evolution, biogeography and phylogenetic relationships in Salvia (Lamiaceae) [J]. Webbia, 70(2): 293-312.
参考文献
RICE A, GLICK L, ABADI S, et al. , 2015. The Chromosome Counts Database (CCDB) — a community resource of plant chromosome numbers [J]. New Phytol, 206(1): 19-26.
参考文献
STEBBINS GL, 1971. Chromosomal evolution in higher plants [M]. London: Edward Arnold: 11-21.
参考文献
STEWART WS, 1939. Chromosome numbers of Californian Salvias [J]. Amer J Bot, 26(9): 730-732.
参考文献
SUN WG, SUN H, LI ZM, 2019. Chromosome data mining and its application in plant diversity research [J]. Plant Sci J, 37(2): 260-269. [孙文光, 孙航, 李志敏, 2019. 染色体数据的挖掘及其在植物多样性进化研究中的利用 [J]. 植物科学学报, 37(2): 260-269. ]
参考文献
WALKER JB, SYTSMA KJ, 2007. Staminal evolution in the genus Salvia (Lamiaceae): molecular phylogenetic evidence for multiple origins of the staminal lever [J]. Ann Bot, 100: 375-391.
参考文献
WEISS SH, SCHNEEWEISS GM, 2013. Karyotype diversity and evolutionary trends in angiosperms [J]. Plant Genom Divers, 2(1): 209-230.
参考文献
WU ZY, LI XW, 1982. On the evolution and distribution in Labiatae [J]. Acta Bot Yunnan, 4(2): 97-118. [吴征镒, 李锡文, 1982. 论唇形科的进化与分布 [J]. 云南植物研究, 4(2): 97-118. ]
参考文献
XU B, CHEN GF, LI ZM, 2020a. Cytological study on four species of Arenaria from Qinghai-Tibet Plateau [J]. Plant Sci J, 38(6): 723-729. [徐波, 陈光富, 李志敏, 2020a. 青藏高原4种无心菜属植物的细胞学研究 [J]. 植物科学学报, 38(6): 723-729. ]
参考文献
XU B, SUN WG, LI ZM, 2020b. Karyological study of five cushion plants of Caryophyllaceae in Qinghai-Tibet Plateau [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin, 40(7): 1157-1163. [徐波, 孙文光, 李志敏, 2020b. 青藏高原5种石竹科垫状植物的核型研究 [J]. 西北植物学报, 40(7): 1157-1163. ]
参考文献
YANG QY, ZHENG D, LIU YH, 1988. Physico-geographical feature and economic development of the dry valleys in the Hengduan Mountains, Southwest China [J]. J Arid Land Resour Environ, 2(2): 17-24. [杨勤业, 郑度, 刘燕华, 1988. 横断山地区干旱河谷的自然特点及其开发利用 [J]. 干旱区资源与环境, 2(2): 17-24. ]
参考文献
YANG Y, SUN H, 2006. Advances in the functional ecology of alpine and arctic plants [J]. Acta Bot Yunnan, 28(1): 43-53. [杨扬, 孙航, 2006. 高山和极地植物功能生态学研究进展 [J]. 云南植物研究, 28(1): 43-53. ]
参考文献
YANG ZJ, ZHANG L, ZHAO HX, et al. , 2009. Chromosome numbers of some species of Salvia (Lamiaceae) from the Sichuan Province, China [J]. Nord J Bot, 27(4): 287-291.
参考文献
YANG ZY, XUN G, YUE ZP, 2014. Cytological study of six Salvia species (Lamiaceae) from the Hengduanshan Mountains region of China [J]. Caryologia, 57(4): 360-366.
参考文献
YAO YH, ZHANG BP, HAN F, et al. , 2010. Spatial pattern and exposure effect of altitudinal belts in the Hengduan Mountains [J]. Mountain Res, 28(1): 11-20. [姚永慧, 张百平, 韩芳, 等, 2010. 横断山区垂直带谱的分布模式与坡向效应 [J]. 山地学报, 28(1): 11-20. ]
参考文献
ZENG GQ, GUO HG, DENG Q, et al. , 2000. Bio-diversity protection in East Himalayas-Hengduan Mountain [J]. Yunnan Environ Sci, 19(1): 14-18. [曾广权, 郭慧光, 邓晴, 等, 2000. 中、缅、印交界地区(东喜马拉雅山-横断山)生物多样性保护研究 [J]. 云南环境科学, 19(1): 14-18. ]
参考文献
ZHAO HX, ZHANG L, FAN X, et al. , 2006. Studies on chromosome numbers of Salvia miltiorrhiza, S. flava and S. evansiana [J]. Chin J Chin Mat Med, 31(22): 1847-1848. [赵红霞, 张利, 凡星, 等, 2006. 丹参、黄花鼠尾和雪山鼠尾染色体数目的研究 [J]. 中国中药杂志, 31(22): 1847-1848. ]
目录contents

    摘要

    鼠尾草属(Salvia)是唇形科(Lamiaceae)最大的属,属下多种为民间常用草药,亦有供观赏的种类。为探究横断山区物种在细胞学水平的进化方式,讨论形态分类学与分子系统学之间的分类关系,该研究通过广泛收集染色体文献资料,采用植物常规压片法对采集自横断山地区6种8居群鼠尾草属植物进行核型分析,并构建了中国地区分布的鼠尾草属植物叶绿体系统发育树。统计结果表明:(1)全世界范围内报道了约23%的鼠尾草属植物染色体数据,其中分布在中国地区的鼠尾草属植物染色体报道率为32.10%,分布在横断山地区的鼠尾草属植物报道率为40.54%,(2)鼠尾草属植物染色体基数以x=8和x=11为主,分布在中国地区的鼠尾草属植物染色体基数均为x=8。实验结果表明:(1)西藏鼠尾草(S. wardii)核型数据为首次报道。(2)雪山鼠尾草(S. evansiana)首次在云南德钦地区发现二倍体居群。将细胞学数据结合叶绿体进化树开展染色体进化关联分析,论证多倍化可能不是鼠尾草属物种适应高海拔环境的主要机制,表明多倍体不是该属物种形成的主要进化途径而是以二倍体水平为主,推测染色体组的加倍可能是物种在形态学与分子系统学上分类关系不一致的原因之一。该研究丰富了横断山区鼠尾草属植物的染色体核型数据,结合区域分子系统树探讨染色体特征的进化关系,为今后深入研究该属物种的核型进化做出了探索,为开展祖先物种染色体基数推演分析补充了基础数据。

    Abstract

    Salvia is the largest genus of the Lamiaceae. Several species of Salvia are used as traditional Chinese medicine, as well as ornamental species. To explore the evolution pattern of species in Hengduan Mountains at the cytological level and to discuss the taxonomic relationship between morphological taxonomy and molecular systematics, based on extensive collection of chromosome literature, the karyotypes of six species (eight populations) of Salvia collected from Hengduan Mountains were analyzed by using conventional plant pressing method, and the chloroplast phylogenetic trees of Salvia distributed in China were constructed. The statistical results were as follows: (1) About 23% of the chromosome data of Salvia was reported all over the world, in which the chromosome reporting rate of Salvia in China was 32.10%. The reporting rate of Salvia in Hengduan Mountains was 40.54%. (2) The chromosome basic number of Salvia were mainly x=8 and x=11, and the chromosome cardinal numbers of Salvia plants distributed in China were x=8. The experimental results were as follows: (1) The karyotype data of S. wardii was reported for the first time. (2) The diploid population of S. evansiana was found for the first time in Deqen, Yunnan. The chromosome evolutionary association analysis was carried out by combining cytological data with chloroplast evolution tree, and it was demonstrated that polyploidy might not be the main mechanism of Salvia adapting to high altitude environment. It showed that polyploid was not the main evolutionary pathway of Salvia plants species formation, but mainly at the level of diploid. So we speculated that the doubling of genome might be one of the reasons for the inconsistency between species morphology taxology and molecular phylogeny taxology. This study enriches the chromosome karyotype data of Salvia in Hengduan Mountains, discusses the evolutionary relationship of chromosome characteristics combined with regional molecular phylogenetic tree, has made exploration for further study of the karyotype evolution of Salvia species in the future, and complements the basic data for the deduction and analysis of the chromosome cardinal number of ancestral species.

  • 横断山区位于“世界屋脊”青藏高原东南部,包括云南西北部、四川西部、西藏东部、青海南部以及甘肃西南部地区,面积约36.4万平方千米(李炳元,1987)。横断山区因南北走向的山脉,海拔落差大,以及受印度洋暖湿气流的影响,形成了显著的沿海拔梯度变化的多种气候类型的生态环境,包括低海拔的干热河谷地区,中海拔的暖温带地区及高海拔的高山冰缘带地区,形成了横断山区丰富的物种多样性。正因如此,横断山区成为全球重要的生物多样性研究中心之一,也因物种多样性丰富而成为研究物种起源演化的天然实验基地(杨勤业等,1988; 曾广权等,2000; 姚永慧等,2010)。

  • 唇形科(Lamiaceae)鼠尾草属(Salvia)是世界性广布的大属,广泛分布于中美洲、南美洲、西亚和东亚地区(Walker &Sytsma,2007),全世界范围共计约980种(Hu et al.,2018)。西亚和地中海地区被认为是鼠尾草的原始分布中心(Masoud et al.,2010)。原产中国的鼠尾草种类有81种24变种,横断山区有37种13变种(中国科学院青藏高原综合科学考察队,1993; Li &Hedge,1994)。该属物种在生长形态、花形态等方面表现出显著的多样性。吴征镒和李锡文(1982)认为鼠尾草属的唇形花冠更适应昆虫传粉,因此是更进化和特化的类群,并且认为横断山地区是该属形成和多样化的中心之一。尽管部分研究人员对产于西喜马拉雅地区的鼠尾草进行了细胞学研究,但是对横断山区鼠尾草属植物的细胞学资料仍研究较少(Gill,1970; Bhattacharya,1978; Haque,1980)。

  • 细胞学核型分析是研究植物进化地位及种群间亲缘关系常用的方法之一,通过对中期细胞染色体组的数目、倍性、形态、大小、着丝粒位置、随体有无等特征分析,再通过计算臂比、染色体长度比、着丝粒指数、染色体长度变异系数以及着丝粒指数变异系数等一系列核型参数计算,来对物种进行分类学研究,分析其亲缘关系和进化地位。研究资料表明鼠尾草属的染色体数目具有多样化。Stewart(1939)对美国加利福尼亚地区5个亚属18种鼠尾草属植物的染色体数目进行研究,发现染色体基数为x=8、12、16。Fujita(1970)根据其染色体基数为x=11,认为鼠尾草属是唇形科中最原始的属,并且是唇形科中染色体基数最高的属。Alberto等(2003)研究了阿根廷地区12种鼠尾草属植物有丝分裂时期染色体形态和减数分裂时期的染色体,发现S. coccineaS. farinaceaS. involucrateS. microphylla为二倍体物种,染色体数目为2n=2x=22、20、22、22,S. cardiophyllaS. procurrensS. splendensS. uliginosa为四倍体物种,染色体数目分别为2n=4x=44、52、44、52,S. stachydifoliaS. pallida为六倍体物种,染色体数目均为2n=6x=66,S. guaraniticaS. rypara为八倍体物种,染色体数目均为2n=8x=88。Gill(1970)对喜马拉雅山系的20种鼠尾草属植物的染色体进行研究,发现鼠尾草属植物的染色体基数具有多样性,其中x=6、7、8是常见的染色体基数。Özdemir和Şenel(1999)报道了S. sclerea的染色体数目2n=22。赵红霞等(2006)报道了我国鼠尾草属植物丹参(S. miltiorrhiza)、黄花鼠尾(S. flava)和雪山鼠草(S. evansiana)的染色体数目2n=16和32。Yang等(2009)对我国横断山脉地区的6种鼠尾草属植物的染色体数目进行了研究,发现S. przewalskii为四倍体,染色体数目为2n=4x=32,S. castaneaS. flavaS. trijugaS. yunnanensis为二倍体,染色体数目均为2n=2x=16,染色体基数为x=8。中国的鼠尾草物种染色体基数主要为x=8。经统计,全世界范围内鼠尾草属植物染色体数据已报道了223种(Ranjbar et al.,2015; Rice et al.,2015),中国地区鼠尾草属染色体数据已报道26种(含4变种1变型),其中横断山区15种(中国科学院青藏高原综合科学考察队,1993; 赵红霞等,2006; Yang et al.,2009; 洪培培等,2011; Yang et al.,2014)。鼠尾草属细胞学研究依旧十分薄弱,而鼠尾草属的分子系统学分类与形态学分类的差异较大,细胞学研究可以为该属物种演化形成及物种多样性提供重要的参考资料(Adams,1968; Weiss &Schneeweiss,2013)。

  • 鼠尾草属的属下分类系统自建立以来就一致存在争议,Bentham(1832)最早构建了鼠尾草属的属下分类系统,此后联合其他新发表的类群整合为4个亚属。此外Briquet在Bentham基础上进行修正,将鼠尾草属划分为8亚属17个组(Engler &Prantl,1899),以上两个系统仍然是目前世界鼠尾草属分类相对完整的属下分类系统。国产鼠尾草属的分类系统由吴征镒和李锡文(1982)在Briquet系统基础上建立,他们依据鼠尾草属植物雄蕊特征将国产鼠尾草分为3个亚属,即弧隔鼠尾草亚属、荔枝草亚属和鼠尾草亚属,以及组和系的分类等级。随着分子生物学的发展,众多学者利用核基因组和叶绿体基因组进行分子系统树的构建(Walker &Sytsma,2007; Hu et al.,2018),以此来对鼠尾草属进行修订。

  • 为补充鼠尾草属植物细胞学染色体数据,在细胞学水平与基因组水平共同探讨鼠尾草属内分类学地位,本研究通过收集鼠尾草属已报道染色体数据资料,并对横断山区6种8居群鼠尾草属植物进行核型分析,还通过叶绿体基因组片段构建的鼠尾草属物种系统发育树,结合细胞学资料,讨论形态分类学与分子系统学之间的分类关系,探究横断山区物种在细胞学水平的进化方式。

  • 1 材料与方法

  • 1.1 实验材料

  • 本研究中使用的鼠尾草属植物种子均采自横断山区,种子详细信息见表1,凭证标本均存放在中国科学院昆明植物研究所标本馆(KUN),细胞学凭证装片存放在云南师范大学(YNNU)植物细胞学研究室。

  • 1.2 实验方法

  • 1.2.1 染色体制片步骤

  • 选取发育良好、籽粒饱满的种子,用蒸馏水清洗种子后放到潮湿滤纸培养皿中,置于24℃恒温箱中萌发,待其根长至1 cm左右将根取下,装入有0.03%的8-羟基喹啉的离心管中,常温避光预处理1.5~2.5 h。放入装有现配卡诺氏固定液(冰乙酸∶无水乙醇=1∶3)的离心管中,置于4℃冰箱中冷藏20 h后转移至70%酒精中3 h。用1 mol·L-1盐酸于60℃下解离11 min。以上步骤之间需用蒸馏水反复冲洗3次将试剂洗净,最后放入装有卡宝品红的离心管中染色2 h。通过压片把制作好的片子放到光学显微镜(Olympus BX-53)下镜检,并挑选分裂中期细胞染色体形态清楚的细胞观察拍照。将染色体形态完好并分散均匀的片子使用中性树胶封装,制作永久封片。

  • 1.2.2 核型分析方法

  • 根据核型分析标准统计30个以上的中期细胞染色观察记录超过85%细胞恒定的染色体数目为该种的最终染色体数目(李懋学和陈瑞阳,1985)。选取6张染色体较为分散、形态良好且位于同一细胞内的图片,利用Adobe Photoshop CC添加5 μm标尺、裁剪及调整后利用染色体测量软件Karyotype V.2量取6个细胞的染色体长短臂长度、臂比等数据(Altinordu et al.,2016),进行同源染色体核型配对分析,然后根据6个细胞的核型数据利用Excel软件进行综合配对,并依据综合配对结果绘制核型模式图,并根据李懋学和陈瑞阳(1985)、Paszko(2006)、Peruzzi和Eroglu(2013)、Peruzzi和Altnordu(2014)等人的标准确定各个种的基本核型参数。并根据Levan等(1964)的染色体分类系统和Stebbins(1971)的标准确定间期核类型、核型公式和染色体的核型不对称类型等(孙文光等,2019)。

  • 表1 本实验材料信息

  • Table1 Experimental material information in this study

  • 1.2.3 鼠尾草属基数与倍性统计

  • 本研究通过整理染色体数据库CCDB(Rice et al.,2015)结合Ranjbar等(2015)的统计研究,分别对鼠尾草属的染色体基数与倍性在世界、中国和横断山区范围内进行了统计,并进行统计图的绘制。

  • 1.2.4 系统发育分析

  • 通过美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)官方网站(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)下载原产中国的并记录在《中国植物志》和Flora of China中的鼠尾草属植物叶绿体标记基因数据(psbA-trnHTrnL-TrnFrbcLycf1-rps15),将其导入Geneious 9.0.2软件连接,并在此软件中对下载自NCBI的叶绿体数据进行处理,分别对不同基因序列开展多重MAFFT比对(Kazutaka et al.,2002)及多基因联合处理(Concatenate Sequences or Alignments)。使用IQ-TREE V.2.1.3版本构建进化树,经过检测最优模型为“TVM+F+R2”模型(Nguyen et al.,2015),通过文献查阅设置龙口花(Horminumpyrenaicum)作为外类群,基于最大似然法(maximum likelihood,ML)构建进化树。通过查询文献,将所有已经发表的染色体数据与本研究中鼠尾草属植物的染色体数据共同在分子进化树上进行体现。

  • 2 结果与分析

  • 2.1 六种八居群鼠尾草属植物核型特征

  • 由染色体形态图、核型模式图及核型分析结果(图1,表2)可知,除甘西鼠尾草(S. przewalskii)为同源四倍体外,其他5种鼠尾草属植物皆为基数x=8的二倍体。着丝粒位置以近中部着丝粒(sm)为主,也有中部着丝粒(m)和近端部着丝粒(st)。核型不对称性除采自四川宝兴的甘西鼠尾草为3B型和采自云南丽江的黄花鼠尾草(S. flava)为2B型外,其余居群核型不对称性均为3A型。平均臂比范围为1.62~2.48,核型不对称系数为61.75%~70.95%,最长/最短染色体比值为1.66~2.17,臂比>2∶1染色体的百分比为25.00%~87.50%。其中黄花鼠尾草、粘毛鼠尾草(S. roborowskii)、雪山鼠尾草(S. evansiana)、毛地黄鼠尾草(S. digitaloides)皆在第一对染色体短臂上具随体,而采自四川宝兴甘西鼠尾草具4~6条数目不定的B染色体,这是首次在甘西鼠尾草内发现B染色体。6种8居群鼠尾草属植物的间期核型均为简单染色中心型。

  • 图1 6种8居群鼠尾草属植物中期细胞图、配对染色体形态图及模式图

  • Fig.1 Metaphase cell, paired chromosome morphology and karyogram of six species of Salvia in eight populations

  • 2.2 鼠尾草属基数与倍性统计结果

  • 染色体基数与染色体倍性统计结果如图2所示。从全世界范围来看,染色体基数以x =7、8、9、10、11为主,x=8和x=11合计约占总数的一半,染色体倍性主要以二倍体物种为主;产自中国地区的鼠尾草属物种染色体基数有x=7、8、10、11,主要以x=8为主,染色体倍性主要以二倍体为主。相比世界范围内的鼠尾草属,中国地区特别是横断山区的染色体基数更加集中且均以x=8为主要基数类型,染色体倍性统计中,无论在哪个范围内统计,二倍体物种都具有绝对的比例优势。

  • 2.3 系统发育分析结果

  • 通过构建国产鼠尾草属62种分子进化树(图3),将鼠尾草属植物的染色体核型数据与系统发育树进行匹配,发现国产鼠尾草属植物染色体基数以x=8为主,倍性以二倍体为主。分子进化树在弧隔鼠尾草亚属(Subg. Salvia)和美洲鼠尾草亚属(Subg. Jungia)这两分支对于形态学分类的支持度最高,除三叶鼠尾草(S. trijuga)外,均属于弧隔鼠尾草亚属,美洲鼠尾草亚属全部物种单独聚为一支; 而荔枝草亚属(Subg. Sclarea)是支持率较低的亚属。在弧隔鼠尾草亚属这一分支上的染色体基数,已报道的除栗色鼠尾草(S. castanea)有x=8和x=11两种染色体基数外,其余的物种均为x=8,出现染色体组加倍的物种有雪山鼠尾草、短唇鼠尾草(S. brevilabra)和甘西鼠尾草,其中雪山鼠尾草又同时拥有二倍体物种。另外,雪山鼠尾草、三叶鼠尾草、圆苞鼠尾草(S. cyclostegia)、暗红鼠尾草(S. atrorubra)和新疆鼠尾草(S. deserta)这5个物种在进化树上表现出在各自的大进化支内都处在相对独立的单一分支中,与各自分支中的大部分物种具有相对较远的亲缘关系,且三叶鼠尾草与新疆鼠尾草没有与形态学分类中所属亚属的大部分物种聚为一支。美洲鼠尾草亚属的染色体基数和倍性均呈现出多样性的特点。而鼠尾草亚属(Subg. Allagospadonopsis)和荔枝草亚属中的染色体报道相对较少,且在与分子系统树匹配上也没有很好的支持,亟需进行细胞学的研究并且进行更加准确的分子进化树的构建。

  • 表2 鼠尾草属植物的染色体核型特征

  • Table2 Karyotype characteristics of Salvia chromosome in this study

  • 3 讨论与结论

  • 鼠尾草属作为唇形科的冠部进化分支,在世界各地广泛分布,与其具有较高的适应能力密不可分。鼠尾草属植物的适应进化特性是由遗传物质对环境的适应所造成,因此鼠尾草属植物的进化特征也与其核型进化有关(黄艳波等,2014)。本研究中通过收集全世界范围内的鼠尾草属染色体数据报道,统计得出,全世界范围内,鼠尾草属植物染色体数据报道率约为23%,中国地区报道率为32.10%,横断山区报道率为40.54%。收集整理中国地区的染色体核型数据并通过NCBI下载叶绿体基因来构建中国地区鼠尾草属植物的分子进化树,并对横断山区的6种8居群鼠尾草属植物进行细胞学实验获得核型数据,从细胞学水平探讨鼠尾草属下分类关系,补充鼠尾草属的染色体数据。本研究西藏鼠尾草核型为首次报道,核型公式为2n=2x=16=2m(2sat)+12sm+2st。雪山鼠尾草在之前的研究中存在二倍体和四倍体两种倍性的个体(Chen et al.,2018),本研究中采自云南德钦的居群为二倍体,其余4种核型结果与前人研究一致,甘西鼠尾草为四倍体物种,黄花鼠尾草、毛地黄鼠尾草、粘毛鼠尾草为二倍体物种,且6种鼠尾草属植物染色体基数均为x=8,为属内出现频率最高的基数类型,染色体数目也为最普遍的16条与32条(Hu et al.,2016)。另外,通过统计染色体倍性,我们发现鼠尾草属中海拔相对较高的横断山区的多倍化比例与中国地区的多倍化比例基本持平,这说明多倍化可能并不是植物适应高山环境的唯一机制(聂泽龙等,2004; 杨扬和孙航,2006)。对于染色体倍性随着统计范围的减小,二倍体比例逐渐降低,推测是由于数据统计量级上巨大差异所造成。

  • 图2 鼠尾草属染色体基数与倍性所占比例图

  • Fig.2 Chromosome cardinal number and ploidy ratio chart of Salvia

  • 图3 中国地区分布鼠尾草属植物基于叶绿体DNA联合数据构建的分子系统树(分支节点数字代表可能性)

  • Fig.3 Molecular phylogenetic tree of Salvia from China based on combined chloroplast DNA data (branch node numbers represent possibilities)

  • 本研究构建的鼠尾草属分子进化树建树结果与Hu等(2018)的研究结果相似,可以较为清晰地在分子进化树分支上划分出4个亚属,但各个亚属会有个别物种掺杂在其他亚属的分支中,特别是荔枝草亚属下物种的分支关系还有待进一步研究。弧隔鼠尾草亚属的分支最为清晰且分为两支,但此分子系统分类学下的亚属关系与传统分类学关系不一致。本研究中6种鼠尾草属植物除粘毛鼠尾草为一年生亚组,其余5种均为多年生亚组,分散于4个不同的支系,分别为隶属于短冠鼠尾草系的雪山鼠尾草、栗色鼠尾草系的黄花鼠尾草、毛地黄鼠尾草系的毛地黄鼠尾草和甘西鼠尾草、西藏鼠尾草系的向鼠尾草。分子系统构建表明粘毛鼠尾草、黄花鼠尾草、毛地黄鼠尾草以及雪山鼠尾草聚为一支,但雪山鼠尾草亲缘关系相对较远;甘西鼠尾草与西藏鼠尾草聚为一支。粘毛鼠尾草与多年生亚组的3种鼠尾草属植物(黄花鼠尾草、毛地黄鼠尾草、雪山鼠尾草)较甘西鼠尾草和西藏鼠尾草亲缘关系较近,而同属一系的毛地黄鼠尾草与甘西鼠尾草却亲缘关系较远,推测可能与甘西鼠尾草染色体组加倍有关。Chen等(2018)研究发现雪山鼠尾草既有二倍体个体又有四倍体个体,但本研究中雪山鼠尾草为二倍体个体,从分子系统树上看,无论是基部类群还是末类群,鼠尾草属染色体大都是二倍体(2n=2x=16),主要是在二倍体水平上的进化,且在染色体倍性的统计中,二倍体物种具有绝对的比例优势,徐波等(2020a,b)的研究也表明在石竹科(Caryophyllaceae)中有多种高山植物维持二倍体进化,并推测二倍体水平上的染色体结构和核型进化是青藏高原地区物种进化的一个重要机制,因此本研究认为多倍化不是鼠尾草属的主要进化途径。

  • 本研究丰富了横断山区鼠尾草属物种的染色体核型数据,验证了多倍化可能并不是植物适应高山环境的唯一机制,论证了多倍化可能不是鼠尾草属的主要进化途径,构建的进化树支持前人分类学结果,分子系统树与染色体数据的结合分析为今后深入研究该属物种的核型进化提供了探索,为开展祖先物种染色体基数推演分析补充了基础数据,但横断山地区的鼠尾草染色体数据仍旧不充分,这可能会造成统计学意义较差,因此染色体数据的补充仍旧十分重要。

  • 参考文献

    • ADAMS RP, 1968. Chromosome numbers in Hypericum and related genera [J]. Brittonia, 20(2): 95-106.

    • ALBERTO CM, SANSO AM, XIFREDA CC, 2003. Chromosomal studies in species of Salvia (Lamiaceae) from Argentina [J]. Bot J Linn Soc, 141(4): 483-490.

    • ALTINORDU F, PERUZZI L, YU Y, et al. , 2016. A tool for the analysis of chromosomes: KaryoType [J]. Taxon, 65(3): 586-592.

    • BENTHAM G, 1832. Labiatarum genera et species: or a description of the genera and species of plants of the order Labiatae, with their general history, characters, affinities, and geographical distribution [M]. Bavaria: Ridgway: 190-312.

    • BHATTACHARYA S, 1978. Study of some Indian members of the genus Salvia with references to the cytological behaviour [J]. Cytologia, 43(2): 317-324.

    • CHEN YP, ZHAO F, PENG H, et al. , 2018. Chromosome numbers of 24 taxa of Lamiaceae from Southwest China [J]. Caryologia, 71(4): 298-306.

    • ENGLER A, PRANTL KAE, 1899. Die Natürlichen pflanzenfamilien nebst ihren gattungen und wichtigeren arten, insbesondere den nutzpflanzen, unter mitwirkung zahlreicher hervorragender fachgelehrten begründet [M]. Leipzig: W. Engelmann: 270-275.

    • FUJITA Y, 1970. Evolution of chromosome numbers in the Labiaceae, especially its relation to the classification and phylogeny of the genus Salvia based on constituents of essential oils [J]. Acta Phytotax Geobot, 24(1): 113-121.

    • GILL LS, 1970. Cytological observations on West-Himalayan Labiatae: Tribe Stachydeae [J]. Phyton Vicente Lopez, 27(2): 177-184.

    • HAQUE MS, 1980. Karyotypes and chromosome morphology in the genus Salvia Linn [J]. Cytologia, 45(4): 627-640.

    • HONG PP, YANG JY, CHEN HW, et al. , 2011. Optimization of chromosome sectioning and chromosome counting of Salvia splendens [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin, 31(10): 2124-2128. [洪培培, 杨建玉, 陈洪伟, 等, 2011. 一串红染色体制片技术优化与计数 [J]. 西北植物学报, 31(10): 2124-2128. ]

    • HU GX, XIANG CLEI, LIU ED, et al. , 2016. Karyotypic study of eighteen taxa of Salvia Lamiaceae from China [J]. Caryologia, 69(1): 50-57.

    • HU GX, TAKANO A, DREW BT, et al. , 2018. Phylogeny and staminal evolution of Salvia (Lamiaceae, Nepetoideae) in East Asia [J]. Ann Bot, 122(4): 649-668.

    • HUANG YB, WEI YK, GE BJ, et al. , 2014. Pollination mechanisms of genus Salvia (Lamiaceae) in East Asia (China) [J]. Acta Ecol Sin, 34(9): 2282-2289. [黄艳波, 魏宇昆, 葛斌杰, 等, 2014. 鼠尾草属东亚分支的传粉模式 [J]. 生态学报, 34(9): 2282-2289. ]

    • KAZUTAKA K, KAZUHARU M, KEI-ICHI K, et al. , 2002. MAFFT: a novel method for rapid multiple sequence alignment based on fast Fourier transform [J]. Nucl Acid Res, 30(14): 3059-3066.

    • LEVAN A, FREDGA K, SANDBERG AA, 1964. Nomenclature for centromeric position on chromosomes [J]. Hereditas, 52(2): 201-220.

    • LI BY, 1987. On the boundaries of the Hengduan Mountains [J]. J Mt Res, 5(2): 74-82. [李炳元, 1987. 横断山脉范围探讨 [J]. 山地研究, 5(2): 74-82. ]

    • LI HW, HEDGE IC, 1994. Flora of China: Vol. 17 [M]. Beijing & St. Louis: Science Press & Missouri Botanical Garden Press: 195-222.

    • LI MX, CHEN RY, 1985. A suggestion on the standardization of karyotype analysis in plants [J]. Wuhan Bot Res, 3(4): 297-302. [李懋学, 陈瑞阳, 1985. 关于植物核型分析的标准化问题 [J]. 武汉植物学研究, 3(4): 297-302. ]

    • MASOUD S, ALIJANPOO B, KHAYYAMI M, 2010. Contribution to cytology of genus Salvia L. (Lamiaceae) in Iran [J]. Caryologia, 63(4): 405-410.

    • NGUYEN LT, SCHMIDT HA, VON HA, et al. , 2015. IQ-TREE: a fast and effective stochastic algorithm for estimating maximum-likelihood phylogenies [J]. Mol Biol Evol, 32(1): 268-274.

    • NIE ZL, SUN H, GU ZJ, 2004. A survey of chromosome numbers from angiosperms of the Hengduan Mountains, S·W·China [J]. Acta Bot Yunnan, 26(1): 35-57. [聂泽龙, 孙航, 顾志建, 2004. 横断山区被子植物染色体研究概况 [J]. 云南植物研究, 26(1): 35-57. ]

    • ÖZDEMI· RC, ŞENEL G, 1999. The morphological, anatomical and karyological properties of Salvia sclarea L. [J]. Turk J Bot, 23(1): 7-18.

    • PASZKO B, 2006. A critical review and a new proposal of karyotype asymmetry indices [J]. Plant Syst Evol, 258(1-2): 39-48.

    • PERUZZI L, EROGLU H, 2013. Karyotype asymmetry: again, how to measure and what to measure? [J]. Comp Cytogenet, 7(1): 1-9.

    • PERUZZI L, ALTNORDU F, 2014. A proposal for a multivariate quantitative approach to infer karyological relationships among taxa [J]. Comp Cytogenet, 8(4): 337-349.

    • QINGHAI-TIBET PCSET, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES, 1993. Vascular plants of Hengduan Mountains Area (Vol. 2) [M]. Beijing: Science Press: 1694-1706. [中国科学院青藏高原综合科学考察队, 1993. 横断山区维管植物(下册) [M]. 北京: 科学出版社: 1694-1706. ]

    • RANJBAR M, PAKATCHI A, BABATAHERI Z, 2015. Chromosome number evolution, biogeography and phylogenetic relationships in Salvia (Lamiaceae) [J]. Webbia, 70(2): 293-312.

    • RICE A, GLICK L, ABADI S, et al. , 2015. The Chromosome Counts Database (CCDB) — a community resource of plant chromosome numbers [J]. New Phytol, 206(1): 19-26.

    • STEBBINS GL, 1971. Chromosomal evolution in higher plants [M]. London: Edward Arnold: 11-21.

    • STEWART WS, 1939. Chromosome numbers of Californian Salvias [J]. Amer J Bot, 26(9): 730-732.

    • SUN WG, SUN H, LI ZM, 2019. Chromosome data mining and its application in plant diversity research [J]. Plant Sci J, 37(2): 260-269. [孙文光, 孙航, 李志敏, 2019. 染色体数据的挖掘及其在植物多样性进化研究中的利用 [J]. 植物科学学报, 37(2): 260-269. ]

    • WALKER JB, SYTSMA KJ, 2007. Staminal evolution in the genus Salvia (Lamiaceae): molecular phylogenetic evidence for multiple origins of the staminal lever [J]. Ann Bot, 100: 375-391.

    • WEISS SH, SCHNEEWEISS GM, 2013. Karyotype diversity and evolutionary trends in angiosperms [J]. Plant Genom Divers, 2(1): 209-230.

    • WU ZY, LI XW, 1982. On the evolution and distribution in Labiatae [J]. Acta Bot Yunnan, 4(2): 97-118. [吴征镒, 李锡文, 1982. 论唇形科的进化与分布 [J]. 云南植物研究, 4(2): 97-118. ]

    • XU B, CHEN GF, LI ZM, 2020a. Cytological study on four species of Arenaria from Qinghai-Tibet Plateau [J]. Plant Sci J, 38(6): 723-729. [徐波, 陈光富, 李志敏, 2020a. 青藏高原4种无心菜属植物的细胞学研究 [J]. 植物科学学报, 38(6): 723-729. ]

    • XU B, SUN WG, LI ZM, 2020b. Karyological study of five cushion plants of Caryophyllaceae in Qinghai-Tibet Plateau [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin, 40(7): 1157-1163. [徐波, 孙文光, 李志敏, 2020b. 青藏高原5种石竹科垫状植物的核型研究 [J]. 西北植物学报, 40(7): 1157-1163. ]

    • YANG QY, ZHENG D, LIU YH, 1988. Physico-geographical feature and economic development of the dry valleys in the Hengduan Mountains, Southwest China [J]. J Arid Land Resour Environ, 2(2): 17-24. [杨勤业, 郑度, 刘燕华, 1988. 横断山地区干旱河谷的自然特点及其开发利用 [J]. 干旱区资源与环境, 2(2): 17-24. ]

    • YANG Y, SUN H, 2006. Advances in the functional ecology of alpine and arctic plants [J]. Acta Bot Yunnan, 28(1): 43-53. [杨扬, 孙航, 2006. 高山和极地植物功能生态学研究进展 [J]. 云南植物研究, 28(1): 43-53. ]

    • YANG ZJ, ZHANG L, ZHAO HX, et al. , 2009. Chromosome numbers of some species of Salvia (Lamiaceae) from the Sichuan Province, China [J]. Nord J Bot, 27(4): 287-291.

    • YANG ZY, XUN G, YUE ZP, 2014. Cytological study of six Salvia species (Lamiaceae) from the Hengduanshan Mountains region of China [J]. Caryologia, 57(4): 360-366.

    • YAO YH, ZHANG BP, HAN F, et al. , 2010. Spatial pattern and exposure effect of altitudinal belts in the Hengduan Mountains [J]. Mountain Res, 28(1): 11-20. [姚永慧, 张百平, 韩芳, 等, 2010. 横断山区垂直带谱的分布模式与坡向效应 [J]. 山地学报, 28(1): 11-20. ]

    • ZENG GQ, GUO HG, DENG Q, et al. , 2000. Bio-diversity protection in East Himalayas-Hengduan Mountain [J]. Yunnan Environ Sci, 19(1): 14-18. [曾广权, 郭慧光, 邓晴, 等, 2000. 中、缅、印交界地区(东喜马拉雅山-横断山)生物多样性保护研究 [J]. 云南环境科学, 19(1): 14-18. ]

    • ZHAO HX, ZHANG L, FAN X, et al. , 2006. Studies on chromosome numbers of Salvia miltiorrhiza, S. flava and S. evansiana [J]. Chin J Chin Mat Med, 31(22): 1847-1848. [赵红霞, 张利, 凡星, 等, 2006. 丹参、黄花鼠尾和雪山鼠尾染色体数目的研究 [J]. 中国中药杂志, 31(22): 1847-1848. ]

  • 参考文献

    • ADAMS RP, 1968. Chromosome numbers in Hypericum and related genera [J]. Brittonia, 20(2): 95-106.

    • ALBERTO CM, SANSO AM, XIFREDA CC, 2003. Chromosomal studies in species of Salvia (Lamiaceae) from Argentina [J]. Bot J Linn Soc, 141(4): 483-490.

    • ALTINORDU F, PERUZZI L, YU Y, et al. , 2016. A tool for the analysis of chromosomes: KaryoType [J]. Taxon, 65(3): 586-592.

    • BENTHAM G, 1832. Labiatarum genera et species: or a description of the genera and species of plants of the order Labiatae, with their general history, characters, affinities, and geographical distribution [M]. Bavaria: Ridgway: 190-312.

    • BHATTACHARYA S, 1978. Study of some Indian members of the genus Salvia with references to the cytological behaviour [J]. Cytologia, 43(2): 317-324.

    • CHEN YP, ZHAO F, PENG H, et al. , 2018. Chromosome numbers of 24 taxa of Lamiaceae from Southwest China [J]. Caryologia, 71(4): 298-306.

    • ENGLER A, PRANTL KAE, 1899. Die Natürlichen pflanzenfamilien nebst ihren gattungen und wichtigeren arten, insbesondere den nutzpflanzen, unter mitwirkung zahlreicher hervorragender fachgelehrten begründet [M]. Leipzig: W. Engelmann: 270-275.

    • FUJITA Y, 1970. Evolution of chromosome numbers in the Labiaceae, especially its relation to the classification and phylogeny of the genus Salvia based on constituents of essential oils [J]. Acta Phytotax Geobot, 24(1): 113-121.

    • GILL LS, 1970. Cytological observations on West-Himalayan Labiatae: Tribe Stachydeae [J]. Phyton Vicente Lopez, 27(2): 177-184.

    • HAQUE MS, 1980. Karyotypes and chromosome morphology in the genus Salvia Linn [J]. Cytologia, 45(4): 627-640.

    • HONG PP, YANG JY, CHEN HW, et al. , 2011. Optimization of chromosome sectioning and chromosome counting of Salvia splendens [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin, 31(10): 2124-2128. [洪培培, 杨建玉, 陈洪伟, 等, 2011. 一串红染色体制片技术优化与计数 [J]. 西北植物学报, 31(10): 2124-2128. ]

    • HU GX, XIANG CLEI, LIU ED, et al. , 2016. Karyotypic study of eighteen taxa of Salvia Lamiaceae from China [J]. Caryologia, 69(1): 50-57.

    • HU GX, TAKANO A, DREW BT, et al. , 2018. Phylogeny and staminal evolution of Salvia (Lamiaceae, Nepetoideae) in East Asia [J]. Ann Bot, 122(4): 649-668.

    • HUANG YB, WEI YK, GE BJ, et al. , 2014. Pollination mechanisms of genus Salvia (Lamiaceae) in East Asia (China) [J]. Acta Ecol Sin, 34(9): 2282-2289. [黄艳波, 魏宇昆, 葛斌杰, 等, 2014. 鼠尾草属东亚分支的传粉模式 [J]. 生态学报, 34(9): 2282-2289. ]

    • KAZUTAKA K, KAZUHARU M, KEI-ICHI K, et al. , 2002. MAFFT: a novel method for rapid multiple sequence alignment based on fast Fourier transform [J]. Nucl Acid Res, 30(14): 3059-3066.

    • LEVAN A, FREDGA K, SANDBERG AA, 1964. Nomenclature for centromeric position on chromosomes [J]. Hereditas, 52(2): 201-220.

    • LI BY, 1987. On the boundaries of the Hengduan Mountains [J]. J Mt Res, 5(2): 74-82. [李炳元, 1987. 横断山脉范围探讨 [J]. 山地研究, 5(2): 74-82. ]

    • LI HW, HEDGE IC, 1994. Flora of China: Vol. 17 [M]. Beijing & St. Louis: Science Press & Missouri Botanical Garden Press: 195-222.

    • LI MX, CHEN RY, 1985. A suggestion on the standardization of karyotype analysis in plants [J]. Wuhan Bot Res, 3(4): 297-302. [李懋学, 陈瑞阳, 1985. 关于植物核型分析的标准化问题 [J]. 武汉植物学研究, 3(4): 297-302. ]

    • MASOUD S, ALIJANPOO B, KHAYYAMI M, 2010. Contribution to cytology of genus Salvia L. (Lamiaceae) in Iran [J]. Caryologia, 63(4): 405-410.

    • NGUYEN LT, SCHMIDT HA, VON HA, et al. , 2015. IQ-TREE: a fast and effective stochastic algorithm for estimating maximum-likelihood phylogenies [J]. Mol Biol Evol, 32(1): 268-274.

    • NIE ZL, SUN H, GU ZJ, 2004. A survey of chromosome numbers from angiosperms of the Hengduan Mountains, S·W·China [J]. Acta Bot Yunnan, 26(1): 35-57. [聂泽龙, 孙航, 顾志建, 2004. 横断山区被子植物染色体研究概况 [J]. 云南植物研究, 26(1): 35-57. ]

    • ÖZDEMI· RC, ŞENEL G, 1999. The morphological, anatomical and karyological properties of Salvia sclarea L. [J]. Turk J Bot, 23(1): 7-18.

    • PASZKO B, 2006. A critical review and a new proposal of karyotype asymmetry indices [J]. Plant Syst Evol, 258(1-2): 39-48.

    • PERUZZI L, EROGLU H, 2013. Karyotype asymmetry: again, how to measure and what to measure? [J]. Comp Cytogenet, 7(1): 1-9.

    • PERUZZI L, ALTNORDU F, 2014. A proposal for a multivariate quantitative approach to infer karyological relationships among taxa [J]. Comp Cytogenet, 8(4): 337-349.

    • QINGHAI-TIBET PCSET, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES, 1993. Vascular plants of Hengduan Mountains Area (Vol. 2) [M]. Beijing: Science Press: 1694-1706. [中国科学院青藏高原综合科学考察队, 1993. 横断山区维管植物(下册) [M]. 北京: 科学出版社: 1694-1706. ]

    • RANJBAR M, PAKATCHI A, BABATAHERI Z, 2015. Chromosome number evolution, biogeography and phylogenetic relationships in Salvia (Lamiaceae) [J]. Webbia, 70(2): 293-312.

    • RICE A, GLICK L, ABADI S, et al. , 2015. The Chromosome Counts Database (CCDB) — a community resource of plant chromosome numbers [J]. New Phytol, 206(1): 19-26.

    • STEBBINS GL, 1971. Chromosomal evolution in higher plants [M]. London: Edward Arnold: 11-21.

    • STEWART WS, 1939. Chromosome numbers of Californian Salvias [J]. Amer J Bot, 26(9): 730-732.

    • SUN WG, SUN H, LI ZM, 2019. Chromosome data mining and its application in plant diversity research [J]. Plant Sci J, 37(2): 260-269. [孙文光, 孙航, 李志敏, 2019. 染色体数据的挖掘及其在植物多样性进化研究中的利用 [J]. 植物科学学报, 37(2): 260-269. ]

    • WALKER JB, SYTSMA KJ, 2007. Staminal evolution in the genus Salvia (Lamiaceae): molecular phylogenetic evidence for multiple origins of the staminal lever [J]. Ann Bot, 100: 375-391.

    • WEISS SH, SCHNEEWEISS GM, 2013. Karyotype diversity and evolutionary trends in angiosperms [J]. Plant Genom Divers, 2(1): 209-230.

    • WU ZY, LI XW, 1982. On the evolution and distribution in Labiatae [J]. Acta Bot Yunnan, 4(2): 97-118. [吴征镒, 李锡文, 1982. 论唇形科的进化与分布 [J]. 云南植物研究, 4(2): 97-118. ]

    • XU B, CHEN GF, LI ZM, 2020a. Cytological study on four species of Arenaria from Qinghai-Tibet Plateau [J]. Plant Sci J, 38(6): 723-729. [徐波, 陈光富, 李志敏, 2020a. 青藏高原4种无心菜属植物的细胞学研究 [J]. 植物科学学报, 38(6): 723-729. ]

    • XU B, SUN WG, LI ZM, 2020b. Karyological study of five cushion plants of Caryophyllaceae in Qinghai-Tibet Plateau [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin, 40(7): 1157-1163. [徐波, 孙文光, 李志敏, 2020b. 青藏高原5种石竹科垫状植物的核型研究 [J]. 西北植物学报, 40(7): 1157-1163. ]

    • YANG QY, ZHENG D, LIU YH, 1988. Physico-geographical feature and economic development of the dry valleys in the Hengduan Mountains, Southwest China [J]. J Arid Land Resour Environ, 2(2): 17-24. [杨勤业, 郑度, 刘燕华, 1988. 横断山地区干旱河谷的自然特点及其开发利用 [J]. 干旱区资源与环境, 2(2): 17-24. ]

    • YANG Y, SUN H, 2006. Advances in the functional ecology of alpine and arctic plants [J]. Acta Bot Yunnan, 28(1): 43-53. [杨扬, 孙航, 2006. 高山和极地植物功能生态学研究进展 [J]. 云南植物研究, 28(1): 43-53. ]

    • YANG ZJ, ZHANG L, ZHAO HX, et al. , 2009. Chromosome numbers of some species of Salvia (Lamiaceae) from the Sichuan Province, China [J]. Nord J Bot, 27(4): 287-291.

    • YANG ZY, XUN G, YUE ZP, 2014. Cytological study of six Salvia species (Lamiaceae) from the Hengduanshan Mountains region of China [J]. Caryologia, 57(4): 360-366.

    • YAO YH, ZHANG BP, HAN F, et al. , 2010. Spatial pattern and exposure effect of altitudinal belts in the Hengduan Mountains [J]. Mountain Res, 28(1): 11-20. [姚永慧, 张百平, 韩芳, 等, 2010. 横断山区垂直带谱的分布模式与坡向效应 [J]. 山地学报, 28(1): 11-20. ]

    • ZENG GQ, GUO HG, DENG Q, et al. , 2000. Bio-diversity protection in East Himalayas-Hengduan Mountain [J]. Yunnan Environ Sci, 19(1): 14-18. [曾广权, 郭慧光, 邓晴, 等, 2000. 中、缅、印交界地区(东喜马拉雅山-横断山)生物多样性保护研究 [J]. 云南环境科学, 19(1): 14-18. ]

    • ZHAO HX, ZHANG L, FAN X, et al. , 2006. Studies on chromosome numbers of Salvia miltiorrhiza, S. flava and S. evansiana [J]. Chin J Chin Mat Med, 31(22): 1847-1848. [赵红霞, 张利, 凡星, 等, 2006. 丹参、黄花鼠尾和雪山鼠尾染色体数目的研究 [J]. 中国中药杂志, 31(22): 1847-1848. ]